您所在位置： &
&nbsp&&nbsp&nbsp&&nbsp
ERG9特异性siRNA表达载体构建及裂殖酵母发酵生产辅酶Q&,10&的研究.pdf91页
本文档一共被下载：
次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。
文档加载中...广告还剩秒
需要金币：200 &&
ERG9特异性siRNA表达载体构建及裂殖酵母发酵生产辅酶Q
你可能关注的文档：
··········
··········
北京化工大学 硕士学位论文
ERG9特异性siRNA表达载体构建及裂殖酵母发酵生产辅酶 Q ,10 的研究 姓名：李文进 申请学位级别：硕士 专业：发酵工程 指导教师：袁其朋 座机电话号码 摘要 i ERG9特异性sRNA表达载体构建及裂殖 酵母发酵生产辅酶Q，o的研究 摘要 在化学结构上，辅酶Q10以醌环为核心，连上一个聚异戊烯侧链。其
生理功能主要来自醌基的氧化还原化学特性和侧链的物理特性。作为线粒
体呼吸链中重要的递氢体，它是细胞自身的天然抗氧化剂，在氧化磷酸化 中起着重要的作用。它是人体中唯一的辅酶Q类物质，其异常的代谢与
人体的许多疾病相关联。目前，辅酶Q。o己作为一种重要的生化药物和多
功能保健品被广泛研究。 Linder 为研究对 本文以粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomycespombe
象，从抑制和沉默角鲨烯代谢支路的角度，对辅酶Qlo的合成代谢进行了
研究，并对辅酶Q。o发酵生产工艺进行了优化。 siRNA寡核苷酸序列插入到mU6 首先，把合成的56bp pro载体中，
对shRNA表达载体构建过程进行了优化，控制退火缓冲液PH在7．5，提 0mol／L
高NaCI含量至150mmol／L以上，退火产物予以1C2H5NO除盐及 100％C2H60沉淀处理，退火效率可达到90％以上。 1 四株具有稳定性的高产菌株。确定UV诱变剂量90s时突变效果最佳。与
出发菌株相比，辅酶Q10产量正变率达到8．33％。实验确定了C／N最佳优
量达到3．44mg／L，比不添加提高了14％。 zeocin耐受性实验确定了转化株在培养基中筛选浓度为1 50Irtg／mL。 北京化工大学硕士研究生学位论文
与原始菌株相比，S．pombe
菌株生长周期延长近10h，但重组菌有较高的遗传稳定性和菌体生物量，
72代后，重组菌S．pombe
产量相对差值缩小6．61％。初步实现了
正在加载中，请稍后...}