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肝癌治疗的研究进展+外文翻译.doc35页
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本科毕业论文
目： 肝癌治疗的研究进展
系： 生命科学技术学院
业： 生物技术
级： 2010级生技（一）班
学生姓名： 徐盼菊
导师姓名： 邢雪琨
二○一四年六月
毕业设计（论文）诚信声明书
本人声明：本人所提交的毕业论文《肝癌治疗的研究进展》是本人在指导教师指导下独立研究、写作的成果，论文中所引用他人的无论以何种方式发布的文字、研究成果，均在论文中加以说明；有关教师、同学和其他人员对本文的写作、修订提出过并为我在论文中加以采纳的意见、建议，均已在我的致谢辞中加以说明并深致谢意。
本论文和资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。
论文作者：
（签字） 时间：
指导教师已阅：
（签字） 时间：
摘要................................................................1
Abstract .............................................................1
1 肝癌的类型 .......................................................2
1.1 原发性肝癌..................................................2
1.2 继发性肝癌..................................................3
2 肝癌的病因及发病机制..............................................3
2.1 原发性肝癌的病因及发病机制..................................3
2.2 继发性肝癌的病因及发病机制..................................5
3 肝癌预防措施......................................................5
3.1 人群预防....................................................5
3.2 个人预防....................................................6
4 传统治疗方法......................................................6
4.1 手术治疗............................
正在加载中，请稍后...　　生物通报道：来自中科院健康科学研究所，美国新泽西儿童健康研究所，山东大学医学院等处的研究人员首次揭示了肿瘤基质干细胞促进原位肿瘤生长的机制，肿瘤基质干细胞是肿瘤基质重要组成部分，这一发现首次阐明了肿瘤基质干细胞和肿瘤相关巨噬细胞作为两类重要的肿瘤基质细胞，具有内在的关联。这项成果公布在Cell Stem Cell杂志上。
文章的通讯作者是健康科学研究所时玉舫研究员，第一作者为任光文。时玉舫研究员是激活诱导淋巴细胞死亡和c-myc对T细胞凋亡调节作用的发现者，他证实了Fas介导的淋巴细胞凋亡与应激反应或鸦片所致的免疫抑制的关系，证明了CD4+ T细胞在哮喘中的决定性作用，为过敏性哮喘的治疗提出了新的方向，入选了千人计划。
间充质干细胞(MSCs)是一类分布于成体内多种器官和组织中的多能干细胞，能够在适当条件下分化成多种组织细胞，已成为再生医学研究的热点之一。近年来，多个研究组发现该类干细胞除了具有分化潜能外，在体内多种生理学、病理学过程中扮演着重要角色。
时玉舫课题组多年来一直致力于MSCs在治疗多种自体免疫性疾病方面的研究，并在揭示MSCs免疫调节机制上走在了世界前列。通过多种体内及体外模型，他们首次表明MSCs与宿主免疫系统有严密的双向调控机制，炎症相关因子诱导MSCs表达效应分子从而抑制体内不正常免疫反应。这些发现为MSCs临床应用起到关键的指导作用。
近期科学家们在肿瘤组织中也发现存在数量不少的MSCs。这些肿瘤基质 MSCs据研究有很大一部分来源于健康组织（如骨髓），并可能是肿瘤相关成纤维细胞的前体细胞。但是，这些肿瘤基质MSCs在肿瘤中到底具有什么功能，它们与正常组织中的MSCs有什么本质差别，此方面研究仍然相当缺乏。
在这篇文章中，研究人员基于此前研究健康组织MSCs的经验，从小鼠自发性肿瘤组织中分离出多个MSC细胞系，详细比较了这些肿瘤基质MSCs与健康组织MSCs的功能性差别。
研究结果表明，相对于健康组织MSCs，肿瘤基质MSCs高表达多种细胞因子及趋化因子，尤其是CCR2家族的趋化因子CCL-2, CCL-7,和CCL-12。这些趋化因子介导肿瘤基质MSCs特异性招募巨噬细胞及单核细胞到肿瘤局部，通过促进新血管生成及免疫抑制达到促进肿瘤生长的目的。因此，相对于健康组织MSCs，肿瘤基质MSCs表现出很强的促瘤效果，而这种促进作用在CCR2及巨噬细胞缺失的小鼠中完全消失。
由于肿瘤基质MSCs相当一部分起源于健康组织中的MSCs，那么当健康组织MSCs到达肿瘤微环境后如何获得这种高效促瘤效果的呢？
进一步研究表明，肿瘤相关的炎症环境中，肿瘤坏死因子作为一种重要的炎症因子，能促使健康组织MSCs获得类似于肿瘤基质MSCs的体外及体内的系列功能，包括趋化因子的上调，体内巨噬细胞招募及促瘤功能。因此，肿瘤相关的炎症环境改变了正常MSCs功能，使之获得高效招募炎性单核及巨噬细胞的能力，从而达到促进肿瘤生长的目的。这一发现首次阐明了肿瘤基质干细胞和肿瘤相关巨噬细胞作为两类重要的肿瘤基质细胞，具有内在的关联。通过降低炎症效应及抑制CCR2信号通路，破坏MSCs与巨噬细胞的有效关联，可成为未来肿瘤治疗的一个新的途径。
（生物通：万纹）
原文摘要：
CCR2-Dependent Recruitment of Macrophages by Tumor-Educated Mesenchymal Stromal Cells Promotes Tumor Development and Is Mimicked by TNFα
Mesenchymal stromal cells (MSCs) tend to infiltrate into tumors and form a major component of the tumor microenvironment. These tumor-resident MSCs are known to affect tumor growth, but the mechanisms are largely unknown. We found that MSCs isolated from spontaneous lymphomas in mouse (L-MSCs) strikingly enhanced tumor growth in comparison to bone marrow MSCs (BM-MSCs). L-MSCs contributed to greater recruitment of CD11b+Ly6C+ monocytes, F4/80+ macrophages, and CD11b+Ly6G+ neutrophils to the tumor. Depletion of monocytes/macrophages, but not neutrophils, completely abolished tumor promotion of L-MSCs. Furthermore, L-MSCs expressed high levels of CCR2 ligands, and monocyte/macrophage accumulation and L-MSC-mediated tumor promotion were largely abolished in CCR2/ mice. Intriguingly, TNFα-pretreated BM-MSCs mimicked L-MSCs in their chemokine production profile and ability to promote tumorigenesis of lymphoma, melanoma, and breast carcinoma. Therefore, our findings demonstrate that, in an inflammatory environment, tumor-resident MSCs promote tumor growth by recruiting monocytes/macrophages.作者简介：时玉舫，男，中国科学院上海生命科学研究院研究员，上海交通大学医学院健康科学研究所所长。曾任美国新泽西医科齿科大学首席教授和罗伯特•伍德•约翰逊医学院分子遗传学、微生物学和免疫学系终身教授。时玉舫博士是激活诱导淋巴细胞死亡和c-myc对T细胞凋亡调节作用的发现者，他证实了Fas介导的淋巴细胞凋亡与应激反应或鸦片所致的免疫抑制的关系;证明了CD4+ T细胞在哮喘中的决定性作用，为过敏性哮喘的治疗提出了新的方向。最近，他发现了成体干细胞免疫调节的分子机制，为干细胞在自身免疫性疾病的治疗和在器官移植上的应用提供了重要理论基础。在国际顶尖学术杂志Science、Nature、Nature Medicine、Immunity等发表论文100余篇，被引用2700余次。曾任Journal of Immunology副主编，现任Cell Research 资深副主编。
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联系信箱：原癌基因c-src相关信号通路的研究进展--《生殖与避孕》2010年04期
原癌基因c-src相关信号通路的研究进展
【摘要】：原癌基因c-src是人或动物细胞中固有的正常基因,在调控细胞的生长、发育、分化和其他生物学功能方面具有重要的作用。c-src及其表达产物Src蛋白是一种非受体酪氨酸蛋白激酶,通过复杂的网络途径及各种信号通路对细胞行为进行调控,参与了细胞内信号转导的过程。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R730.2【正文快照】：
原癌基因c-src是Bioshop等于1976年发现的第1个细胞癌基因,广泛存在于酵母、果蝇、脊椎动物乃至人类正常细胞中。c-src基因具有较强的转化细胞的能力,在调控细胞的生长、发育、分化和其他生物学功能方面具有重要的作用。原癌基因c-src的表达产物Src蛋白,是最早发现的Src家族激
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京公网安备74号狂犬病病毒基质蛋白的真核表达及其在细胞中的定位--《天津农学院》2013年硕士论文
狂犬病病毒基质蛋白的真核表达及其在细胞中的定位
【摘要】：狂犬病是由狂犬病病毒感染引起的一种侵害中枢神经系统的重要人兽共患传染病，一旦发病，病死率几乎为100%。
狂犬病病毒为弹状病毒科、狂犬病毒属成员。其基因组为单股负链RNA，能够转录和翻译5种结构蛋白，分别为基质蛋白（M），核蛋白（N），磷蛋白（P），糖蛋白（G）和转录酶大蛋白（L）。基质蛋白（M）为狂犬病病毒5种结构蛋白中分子量最小的结构蛋白,该蛋白在结构上形成糖蛋白与核糖核蛋白体间的连接，功能上则与狂犬病病毒粒子的释放及病毒毒力有关。国外对基质蛋白的报道较多，而国内相关研究的报道较少。
腺病毒表达系统是近年来广泛应用的真核表达系统之一，因其可对外源蛋白进行正确表达和修饰，且操作简单，使用安全，因此在兽医学研究领域也得到了广泛应用。表达目的蛋白的重组腺病毒已广泛用于疫苗研究、病原检测技术研究以及病毒结构蛋白的功能研究等领域。
本研究拟构建表达狂犬病病毒基质蛋白（M）的复制缺陷型人5型腺病毒，明确重组病毒生长和表达外源蛋白的特性，并对其感染细胞后基质蛋白的表达进行细胞内定位，为基质蛋白功能研究奠定基础。
以狂犬病病毒强毒BD06株脑内注射感染小鼠，取感染死亡小鼠全脑，提取总RNA，以RT-PCR法扩增获得600bp左右的基质蛋白基因，连接入pMD18-T载体。测序鉴定正确后，将M蛋白基因的完整开放阅读框克隆至腺病毒表达系统穿梭质粒，获得重组穿梭质粒pacAd5-BD06-M；以罗氏转染液介导线性化骨架质粒pacAd59.2-100和重组穿梭质粒pacAd5-BD06-M共转染HEK-293AD细胞，9天后细胞出现典型病变。取培养物进行电镜观察，可见典型的腺病毒样粒子；Western blot检测显示重组腺病毒细胞培养物可与狂犬病病毒BD06株M蛋白多克隆抗体反应，形成约24kD的特异性印迹条带；在HEK-293AD细胞上测定重组腺病毒的平均产毒滴度为1×10~(7.0)CFU/mL，比野生型腺病毒的滴度略有下降。重组腺病毒rAd5-BD06-M免疫昆明小鼠，免疫后28天采集血清，进行病毒中和试验，证实该血清不具备病毒中和活性。
狂犬病病毒强毒JX08-45CC、弱毒SRV9、街毒BD06株、分别感染BHK-21细胞36h后，表达M蛋白的重组腺病毒rAd5-BD06-M感染HEK-293AD细胞后24h，应用抗狂犬病病毒基质蛋白多克隆抗体进行间接免疫荧光检测,激光共聚焦扫描。结果显示，JX08-45CC、SRV9、BD06株狂犬病病毒的基质蛋白主要存在位于细胞质内和核膜上，而感染重组腺病毒rAd5-BD06-M的HEK-293AD细胞，表达的基质蛋白则主要定位于细胞质和核质内。
综上所述，本研究成功构建了表达BD06-M蛋白的复制缺陷型人5型重组腺病毒，并从形态学、病原学、免疫学等方面对获得的重组腺病毒进行了鉴定。不同毒力狂犬病病毒株分别感染BHK-21细胞，其中的基质蛋白主要位于细胞质内和核膜上。而感染重组腺病毒rAd5-BD06-M的HEK-293AD细胞，表达的基质蛋白位于细胞质和核质内。本研究为进一步研究狂犬病病毒基质蛋白的功能奠定了基础。
【关键词】：
【学位授予单位】：天津农学院【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2013【分类号】：S852.65【目录】：
中文摘要7-9Abstract9-11第一章 引言11-24 1 狂犬病及狂犬病病毒11-12 2 本研究的目的和意义12 3 狂犬病病毒的分子生物学研究进展12-15 4 狂犬病病毒的组装及出芽15-19 5 M 蛋白功能研究进展19-21 6 外源基因常用表达系统介绍21-22 总结22-24第二章 狂犬病病毒 BD06 株基质蛋白的真核表达及鉴定24-50 1 材料与方法24-40
1.1 试验材料24-27
1.2 试验方法27-40 2 结果40-47 3 讨论47-49 4 小结49-50第三章 狂犬病病毒基质蛋白在细胞中的定位50-56 1 材料与方法50-53
1.1 试验材料50-51
1.2 方法51-53 2 结果53-54 3 讨论54-55 4 小结55-56第四章 结论56-57参考文献57-61附录61-62致谢62-63攻读学位期间发表的论文63
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